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主營：原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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| 先生： |
為什么有的基因定位結果與預想的不一致？
對于一個特定的定位載體，只要熒光表達較好，其定位結果是確定的，不會隨人為意愿或操作而改變。至于有時候和預想的結果不一樣，可能和蛋白本身、選擇的表達載體以及熒光蛋白融合方式等有關。
為什么有的普通定位結果出來后無法準確判斷其定位位置？
細胞中的細胞器復雜且多樣，除一些常見的、特征比較明顯的細胞器外，蛋白互作，有些細胞器在激光共聚焦下形狀比較相似，例如：線粒體、過氧化物酶體、高爾基體等細胞器，它們的熒光表達形狀可能都是點狀，因此不易區分。這時可以結合基因的其他功能研究來判斷其可能表達的位置。另外，蛋白表達本身也是一個復雜的過程，涉及到多個合成場所及轉運過程，自身表達情況可能比較復雜，因此不易判斷具體的表達位置。
標準分類器在蛋白質亞細胞定位中的評估：Debasish Mohapatra 等人對三種標準分類器（Classification And Regression Tree，CART；K-Nearest Neighbor，KNN；Support Vector Machine，SVM）在蛋白質亞細胞定位預測中的性能進行了比較。實驗結果表明，SVM 在準確性和宏觀平均精度方面表現較好，而 CART 在宏觀平均召回率和宏觀 F1 分數方面表現較好。
基于 AdaBoost Learner 的蛋白質亞細胞定位預測：Yu-Huan Jin 等人介紹了一種基于 AdaBoost Learner 的蛋白質亞細胞定位預測方法。該方法利用蛋白質的氨基酸組成進行預測，通過 Jackknife 交叉驗證和獨立數據集測試表明，AdaBoost 是一種穩健有效的模型，預測準確率高于其他現有預測器。
基因法轉化洋蔥表皮細胞：
分別用70%乙醇和滅菌蒸餾水清洗金粉（直徑為1 μm），加入滅菌蒸餾水制成金粉懸浮液，取100 μL 放在含有1.0 cm2 洋蔥表皮的玻璃皿中，邊振蕩邊加入10 μL pCambia2301-GaMYB2-GFP質粒，逐步加入40 μL 0.1 mol·L-1 亞精胺和100 μL2.5 mol·L-1 CaCl2，振蕩混勻。基因GDS-80轟擊時氦氣罐的氣壓為1 300 psi，取10 μL DNA 包裹好的微粒懸浮液加到基因中央，進行轟擊，之后放置25℃避光過夜培養，使用ConfocalLaser激光共聚焦顯微鏡觀察。
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第3年
