湖北熒光原位雜交-貝科新肽(推薦商家)

詢盤留言 |投訴|申領(lǐng)|刪除 產(chǎn)品編號(hào)：589441445 更新時(shí)間：2024-12-29

武漢貝科新肽科技有限公司

主營(yíng)業(yè)務(wù)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
公司官網(wǎng)：bkxtbio.com.cn
公司地址：湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號(hào)紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號(hào)

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同一樣本可以多次做原位雜交實(shí)驗(yàn)嗎?

一般情況下，如果操作沒有得到理想的結(jié)果，是可以將探針洗滌然后進(jìn)行再次的雜交的。如果使用的是直標(biāo)型探針，還可以使用不同探針對(duì)同一樣本進(jìn)行反復(fù)雜交。針對(duì)不同的樣本，處理方法略有不同。

原位雜交實(shí)操中哪些因素比較重要?

重要的因素：溫度、光照、濕度和試劑的PH值。溫度和濕度直接影響著探針和目標(biāo)DNA的雜交效率；光照影響著熒光染料的強(qiáng)度，所以探針要避光保存，其已經(jīng)雜交的片子可用防熒光淬火劑封片且避光保存；各種試劑pH也要達(dá)到要求，熒光原位雜交，這也直接關(guān)系到原位雜交的穩(wěn)定性。

和其它實(shí)驗(yàn)方法一樣，必須同時(shí)設(shè)對(duì)照試驗(yàn)以證明其實(shí)驗(yàn)結(jié)果特異性。對(duì)照試驗(yàn)的設(shè)置須根據(jù)核酸探針和靶核苷酸的種類和現(xiàn)有的可能條件去選定。ISHH的優(yōu)點(diǎn)是它的高度特異性，它可測(cè)定組織、培養(yǎng)的單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞提取物中的核苷酸含量。應(yīng)用高敏感度的性標(biāo)記cRNA探針在理想的ISHH的實(shí)驗(yàn)條件下檢測(cè)mRNA，其敏感度可達(dá)到20個(gè)mRNA拷貝/每個(gè)細(xì)胞。由于雙鏈DNA的穩(wěn)定性，在用ISHH定位DNA時(shí)很少發(fā)生丟失，降解，其敏感性高到能夠顯示在染色體鋪片上，有時(shí)甚至在組織切片上的單個(gè)基因拷貝。正因?yàn)槿绱耍瑢?duì)ISHH結(jié)果的解釋應(yīng)持慎重態(tài)度，特別是前人未報(bào)告過的新發(fā)現(xiàn)。

原位雜交技術(shù)的原理是什么？有何用途

原位雜交技術(shù)的原理是利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基序列，將有性或非性的外源核酸(即探針)與組織、細(xì)胞或染色體上待測(cè)DNA或RNA互補(bǔ)配對(duì)，結(jié)合成專一的核酸雜交分子，經(jīng)一定的檢測(cè)手段將待測(cè)核酸在組織、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列要具備3個(gè)重要條件：組織、細(xì)胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補(bǔ)的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標(biāo)記物(曾呈奎等2000)。

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