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在酵母雙雜交系統(tǒng)中，BD與X蛋白融合，AD與Y蛋白融合，如果X、Y之間形成蛋白-蛋白復合物，AD與BD會在空間上充分接近，重新構(gòu)成結(jié)構(gòu)域，啟動報告基因的轉(zhuǎn)錄。擁有BD質(zhì)粒的酵母可以在某一缺陷培養(yǎng)基上生長，擁有AD質(zhì)粒的酵母菌可以在另一種缺陷培養(yǎng)基上生長，通過接合（mating）或共轉(zhuǎn)化使酵母同時擁有AD與BD質(zhì)粒。如果BD上的目的蛋白與AD上的誘餌蛋白存在相互作用，這樣的酵母可以在三缺及四缺的培養(yǎng)基上生長，并啟動β-半乳糖苷酶基因的轉(zhuǎn)錄。
分子病理學是與分子生物學、細胞遺傳學等學科相互滲透，在蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子水平上研究疾病病因、發(fā)病機制、形態(tài)變化及功能損害等方面發(fā)生和發(fā)展規(guī)律的新的分支學科，對疾病的病因、發(fā)展、發(fā)病機制及形態(tài)變化，從傳統(tǒng)形態(tài)學概念深入至分子或基因水平，分子病理已成為腫1瘤病理研究中重要的內(nèi)容和手段。①細胞特異性mRNA轉(zhuǎn)錄的定位，可用于基因圖譜，分子病理技術(shù)服務(wù)，基因表達和基因組進化的研究；
適用場景
1、高靈敏度地檢測蛋白-蛋白的交互作用；
2、尋找在蛋白-蛋白交互作用中起關(guān)鍵作用的結(jié)構(gòu)域或活性位點；
3、尋找與靶蛋白相互作用的新蛋白；
4、尋找具有藥1物治1療作用的小分子多肽；
5、尋找調(diào)控蛋白質(zhì)相互作用的化合物；
6、繪制蛋白質(zhì)相互作用圖譜。
酵母雙雜交技術(shù)的優(yōu)點
1、無需純化蛋白；
2、檢測在活1細胞內(nèi)進行，可以在一定程度上代表體內(nèi)的真實情況；
3、檢測的結(jié)果是基因表達產(chǎn)物的積累效應(yīng)，因而可檢測存在于蛋白質(zhì)之間的微弱的或暫時的相互作用；
4、酵母雙雜交系統(tǒng)可采用不同組織、器1官、細胞類型和分化時期材料構(gòu)建cDNA文庫，并能分析細胞質(zhì)、細胞核等多種亞細胞部位的蛋白。
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第4年
