原位雜交第三天
1) ? ? ? ?用1ml含10%熱滅清的MABT溶液置換溶液,放置搖床上25分鐘,然后用1mlMABT置換,25分鐘,再用1mlMABT溶液置換,一小時以上,后用1mlMABT溶液置換,熒光原位雜交技術,25分鐘。
2) ? ? ? ?用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置五分鐘。
3)將胚胎轉入十六孔板中,吸去staining buffer,加上300ul BM Purple AP Substrate(底物,用之前加5mM左旋米唑),十六孔板外面包上錫箔紙以避光,避免搖動,室溫下顯色。
4)每隔一小時觀察胚胎是否開始顯色
5)將顯色完全的胚胎中的底物吸出,用PBST洗兩三次后加上4%多聚甲醛固定,拍照。
6)4C冰箱保存。
植物染色體原位雜交是一種重要的分子生物學技術,它可以用來研究植物基因組的結構和功能。該技術利用DNA探針與目標DNA序列的互補性結合,通過熒光或性標記來檢測目標DNA序列在染色體上的位置和數量。
植物染色體原位雜交技術的基本原理是將DNA探針標記上熒光或性同位素,原位雜交檢測,然后將其與目標DNA序列進行雜交。在雜交過程中,探針與目標DNA序列互補結合,原位雜交,形成穩定的雙鏈DNA分子。隨后,熒光原位雜交,通過熒光或性同位素探測技術,可以檢測到目標DNA序列在染色體上的位置和數量。
原位雜交是一項非常重要的生物技術,可以用于研究基因表達和調控,檢測基因變異和染色體異常,監測細胞生長和凋亡,以及識別特定的細胞類型或組織。然而,它需要特殊的操作技術和設備,以及嚴格的對照實驗才能獲得可靠的結果。
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