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主營：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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亞細(xì)胞定位原理
利用GFP、RFP等熒光蛋白具有的熒光性質(zhì)和靈敏性，來示蹤細(xì)胞內(nèi)的蛋白。將目標(biāo)蛋白與熒光蛋白的N端或者C端融合，通過瞬轉(zhuǎn)或穩(wěn)轉(zhuǎn)，使該融合蛋白在受體材料細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，目標(biāo)蛋白會(huì)牽引熒光蛋白一起定位到目標(biāo)細(xì)胞器，湖北亞細(xì)胞定位，經(jīng)過激光共聚焦顯微鏡激光照射，熒光蛋白會(huì)發(fā)出熒光，通過觀察熒光蛋白在細(xì)胞內(nèi)顯示的位置，從而可以確定目標(biāo)蛋白的亞細(xì)胞定位情況，即可對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行準(zhǔn)確定位。
為什么有的基因定位結(jié)果與預(yù)想的不一致？
對(duì)于一個(gè)特定的定位載體，只要熒光表達(dá)較好，其定位結(jié)果是確定的，不會(huì)隨人為意愿或操作而改變。至于有時(shí)候和預(yù)想的結(jié)果不一樣，可能和蛋白本身、選擇的表達(dá)載體以及熒光蛋白融合方式等有關(guān)。
為什么有的普通定位結(jié)果出來后無法準(zhǔn)確判斷其定位位置？
細(xì)胞中的細(xì)胞器復(fù)雜且多樣，除一些常見的、特征比較明顯的細(xì)胞器外，有些細(xì)胞器在激光共聚焦下形狀比較相似，例如：線粒體、過氧化物酶體、高爾基體等細(xì)胞器，它們的熒光表達(dá)形狀可能都是點(diǎn)狀，因此不易區(qū)分。這時(shí)可以結(jié)合基因的其他功能研究來判斷其可能表達(dá)的位置。另外，亞細(xì)胞定位公司，蛋白表達(dá)本身也是一個(gè)復(fù)雜的過程，亞細(xì)胞定位找哪里，涉及到多個(gè)合成場所及轉(zhuǎn)運(yùn)過程，自身表達(dá)情況可能比較復(fù)雜，因此不易判斷具體的表達(dá)位置。
黃金納米棒在癌細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位：Sana Mesiya 等人研究了黃金納米棒在癌細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位。結(jié)果表明，洋蔥亞細(xì)胞定位，黃金納米棒定位于癌細(xì)胞的線粒體和溶酶體中，這一發(fā)現(xiàn)可能有助于開發(fā)基于納米技術(shù)的激光免疫療法。
檳榔 Catalase 基因的亞細(xì)胞定位：梁婷等人通過同源和 RACE 技術(shù)獲得檳榔全長 cDNA，并對(duì)其進(jìn)行生物信息學(xué)分析及亞細(xì)胞定位。結(jié)果表明，檳榔 Catalase 基因編碼的蛋白質(zhì)可能定位于特定的細(xì)胞器中。
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第3年
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