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武漢貝科新肽科技有限公司

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亞細胞定位原理

利用GFP、RFP等熒光蛋白具有的熒光性質和靈敏性,來示蹤細胞內的蛋白。將目標蛋白與熒光蛋白的N端或者C端融合,通過瞬轉或穩轉,使該融合蛋白在受體材料細胞內表達,目標蛋白會牽引熒光蛋白一起定位到目標細胞器,湖北亞細胞定位,經過激光共聚焦顯微鏡激光照射,熒光蛋白會發出熒光,通過觀察熒光蛋白在細胞內顯示的位置,從而可以確定目標蛋白的亞細胞定位情況,即可對蛋白質進行準確定位。

為什么有的基因定位結果與預想的不一致?

對于一個特定的定位載體,只要熒光表達較好,其定位結果是確定的,不會隨人為意愿或操作而改變。至于有時候和預想的結果不一樣,可能和蛋白本身、選擇的表達載體以及熒光蛋白融合方式等有關。

為什么有的普通定位結果出來后無法準確判斷其定位位置?

細胞中的細胞器復雜且多樣,除一些常見的、特征比較明顯的細胞器外,有些細胞器在激光共聚焦下形狀比較相似,例如:線粒體、過氧化物酶體、高爾基體等細胞器,它們的熒光表達形狀可能都是點狀,因此不易區分。這時可以結合基因的其他功能研究來判斷其可能表達的位置。另外,亞細胞定位公司,蛋白表達本身也是一個復雜的過程,亞細胞定位找哪里,涉及到多個合成場所及轉運過程,自身表達情況可能比較復雜,因此不易判斷具體的表達位置。

黃金納米棒在癌細胞中的亞細胞定位:Sana Mesiya 等人研究了黃金納米棒在癌細胞中的亞細胞定位。結果表明,洋蔥亞細胞定位,黃金納米棒定位于癌細胞的線粒體和溶酶體中,這一發現可能有助于開發基于納米技術的激光免疫療法。

檳榔 Catalase 基因的亞細胞定位:梁婷等人通過同源和 RACE 技術獲得檳榔全長 cDNA,并對其進行生物信息學分析及亞細胞定位。結果表明,檳榔 Catalase 基因編碼的蛋白質可能定位于特定的細胞器中。

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