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武漢科銳諾生物科技有限公司

主營:外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術服務

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提供酵母雙雜交技術服務-武漢科銳諾(圖)

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武漢科銳諾生物科技有限公司

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雜交結束后,去除雜交液,立即于室溫把濾膜放入大體積(300-500ml)的2×SSC和0.1% SDS溶液中,輕輕振搖5分鐘,并將濾膜至少翻轉一次。重復洗 一次,同時應避免膜干涸。

68℃用300-500ml 1×SSC和0.1% SDS溶液洗膜兩次,每次1-1.5小時。此時已可進行自顯影。如背景很高或實驗要求嚴格的洗膜條件,可用300-500ml 0.2×SSC和0.1% SDS的溶液于68℃將濾膜浸泡60分鐘。

把濾膜放在紙巾上于室溫晾干后,把濾膜(編號面朝上)放在一張保鮮膜上,并在保鮮膜上作幾個不對稱的標記,以使濾膜與性自顯影片位置對應。

用第二張保鮮膜蓋住濾膜。加X片并加上增感屏于-70℃曝光12-16小時。

底片顯影后,在底片上貼一張透明硬紙片。在紙上標記陽性雜交信號的位置,提供酵母雙雜交技術服務,同時在不對稱分布點的位置上作出標記。可從底片上取下透明紙,通過對比紙上的點與瓊脂上的點來鑒定陽性菌落。

適用場景

1、高靈敏度地檢測蛋白-蛋白的交互作用;

2、尋找在蛋白-蛋白交互作用中起關鍵作用的結構域或活性位點;

3、尋找與靶蛋白相互作用的新蛋白;

4、尋找具有藥1物治1療作用的小分子多肽;

5、尋找調控蛋白質相互作用的化合物;

6、繪制蛋白質相互作用圖譜。

酵母雙雜交技術的優(yōu)點

1、無需純化蛋白;

2、檢測在活1細胞內進行,可以在一定程度上代表體內的真實情況;

3、檢測的結果是基因表達產(chǎn)物的積累效應,因而可檢測存在于蛋白質之間的微弱的或暫時的相互作用;

4、酵母雙雜交系統(tǒng)可采用不同組織、器1官、細胞類型和分化時期材料構建cDNA文庫,并能分析細胞質、細胞核等多種亞細胞部位的蛋白。

分子病理學是與分子生物學、細胞遺傳學等學科相互滲透,在蛋白質和核酸等生物大分子水平上研究疾病病因、發(fā)病機制、形態(tài)變化及功能損害等方面發(fā)生和發(fā)展規(guī)律的新的分支學科,對疾病的病因、發(fā)展、發(fā)病機制及形態(tài)變化,從傳統(tǒng)形態(tài)學概念深入至分子或基因水平,分子病理已成為腫1瘤病理研究中重要的內容和手段。①細胞特異性mRNA轉錄的定位,可用于基因圖譜,基因表達和基因組進化的研究;

提供酵母雙雜交技術服務-武漢科銳諾(圖)由武漢科銳諾生物科技有限公司提供。武漢科銳諾生物科技有限公司是湖北 武漢 ,技術合作的見證者,多年來,公司貫徹執(zhí)行科學管理、創(chuàng)新發(fā)展、誠實守信的方針,滿足客戶需求。在科銳諾領導攜全體員工熱情歡迎各界人士垂詢洽談,共創(chuàng)科銳諾更加美好的未來。

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