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武漢貝科新肽科技有限公司

主營:原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選

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武漢貝科新肽公司-熒光原位雜交

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武漢貝科新肽科技有限公司

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原位雜交技術可以應用于以下場景:

組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位。例如,可以用于檢測EB病毒mRNA、人類狀瘤病毒和巨細胞病毒DNA等。

癌基因、抑癌基因及其他各種功能基因在轉錄水平的表達及其變化的檢測。

檢測染色體的變化,如染色體數量異常和染色體易位等。

在植物基因組研究中的應用。例如,熒光原位雜交,通過與特定基因序列的探針進行雜交,可以在植物染色體上定位到目標基因的位置,進而構建遺傳圖譜,為植物育種和基因組研究提供基礎數據。

熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世紀80年代末在性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非性分子細胞遺傳技術,以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導分子(reporter molecule)結合,雜交后再通過細胞化學過程連接上熒光染料.FISH的基本原理是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標記,然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上,再用與熒光素分子偶聯的單與探針分子特異性結合來檢測DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對定量分析.FISH具有安全、快速、靈敏度高、探針能長期保存、能同時顯示多種顏色等優點,不但能顯示中期分裂相,還能顯示于間期核.同時在熒光原位雜交基礎上又發展了多彩色熒光原位雜交技術和染色質纖維熒光原位雜交技術.

將32 P標記的雙鏈DNA探針于100℃加熱5分鐘,迅速置于冰浴中。單鏈探針不必變性。將探針加到雜交袋中雜交過夜。雜交期間,盛濾膜的容器應蓋嚴,以防液體蒸發。

雜交結束后,去除雜交液,立即于室溫把濾膜放入大體積(300-500ml)的2×SSC和0.1% SDS溶液中,輕輕振搖5分鐘,并將濾膜至少翻轉一次。重復洗 一次,同時應避免膜干涸。

68℃用300-500ml 1×SSC和0.1% SDS溶液洗膜兩次,每次1-1.5小時。此時已可進行自顯影。如背景很高或實驗要求嚴格的洗膜條件,可用300-500ml 0.2×SSC和0.1% SDS的溶液于68℃將濾膜浸泡60分鐘。

武漢貝科新肽公司-熒光原位雜交由武漢貝科新肽科技有限公司提供。武漢貝科新肽科技有限公司是一家從事“原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選”的公司。自成立以來,我們堅持以“誠信為本,穩健經營”的方針,勇于參與市場的良性競爭,使“原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選”品牌擁有良好口碑。我們堅持“服務至上,用戶至上”的原則,使貝科新肽在化學試劑中贏得了客戶的信任,樹立了良好的企業形象。 特別說明:本信息的圖片和資料僅供參考,歡迎聯系我們索取準確的資料,謝謝!

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