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主營(yíng)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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組織原位雜交(Tissue in situ hybridization），即原位雜交組織化學(xué)技術(shù)和原位雜交細(xì)胞化學(xué)技術(shù)
原位雜交技術(shù)的基本原理
利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基順序，通過(guò)堿基對(duì)之間非共價(jià)鍵的形成，出現(xiàn)穩(wěn)定的雙鏈區(qū)，形成雜交的雙鏈。
1.兩條核苷酸單鏈片段，在適宜的條件下，通過(guò)氫鍵結(jié)合，形成DNA-DNA、DNA一RNA或RNA一RNA雙鍵分子
2.應(yīng)用帶有標(biāo)記的（有性同位素，如3H、35S、32P，熒光素、生物素、等非性物質(zhì))DNA或RNA片段作為核酸探針，與組織切片或細(xì)胞內(nèi)待測(cè)核酸(RNA或DNA）片段進(jìn)行雜交
3.用自顯影等方法予以顯示，在光鏡或電鏡下觀察目的mRNA或DNA的存在與定位
用原位雜交術(shù)，可在原位研究細(xì)胞合成某種多肽或蛋白質(zhì)的基因表達(dá)。
此方法有很高的敏感性和特異性，可進(jìn)一步從分子水來(lái)探討細(xì)胞的功能表達(dá)及其調(diào)節(jié)機(jī)制。已成為當(dāng)今細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)研究的重要手段。
原位雜交技術(shù)在許多領(lǐng)域都有應(yīng)用，以下是其中幾個(gè)具體應(yīng)用：
細(xì)胞生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)：在細(xì)胞生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)領(lǐng)域，原位雜交技術(shù)常被用于研究基因的表達(dá)和定位。例如，通過(guò)標(biāo)記特定基因的探針，可以在細(xì)胞或組織中檢測(cè)特定基因序列的存在和分布，進(jìn)而了解基因在細(xì)胞分化、發(fā)育和功能中的作用。
基因組學(xué)和遺傳學(xué)研究：原位雜交技術(shù)也可用于基因組學(xué)和遺傳學(xué)研究。例如，通過(guò)標(biāo)記多個(gè)基因探針，可以檢測(cè)基因組中的多個(gè)基因序列，從而進(jìn)行基因定位、基因表達(dá)譜分析、基因突變檢測(cè)等研究。
病毒學(xué)和病原微生物研究：在病毒學(xué)和病原微生物學(xué)領(lǐng)域，原位雜交技術(shù)常被用于檢測(cè)和定位病毒、細(xì)菌等病原微生物。例如，通過(guò)標(biāo)記特異性或核酸探針，可以檢測(cè)組織中病原微生物的存在、情況以及分布特征，從而為疾病的預(yù)防、診斷和提供依據(jù)。
總之，原位雜交技術(shù)在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、基因組學(xué)、遺傳學(xué)、病毒學(xué)和病原微生物學(xué)等領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用價(jià)值，為人類認(rèn)識(shí)生命現(xiàn)象、探究疾病機(jī)制和提供了有力的技術(shù)支持。
植物原位雜交在遺傳育種方面的應(yīng)用主要包括：
檢測(cè)物種或品種特異性：通過(guò)植物原位雜交技術(shù)可以檢測(cè)出不同物種或品種之間基因表達(dá)的差異，從而為物種或品種特異性研究提供依據(jù)。
遺傳育種：通過(guò)植物原位雜交技術(shù)可以檢測(cè)到不同品種之間基因表達(dá)的差異，染色體原位雜交，從而為遺傳育種提供重要的參考信息。例如，通過(guò)將特定的外源基因?qū)氲街参锛?xì)胞中，然后利用原位雜交技術(shù)檢測(cè)該基因在植物細(xì)胞中的位置和表達(dá)情況，為遺傳育種提供重要的參考信息。
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