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武漢貝科新肽科技有限公司

主營:原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選

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熒光原位雜交-貝科新肽(在線咨詢)-原位雜交

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武漢貝科新肽科技有限公司

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一. 原位雜交天

1. 重新水化和固定

1) 吸取固定好的胚胎,加入50%的PBST溶液,放置5分鐘。

2) 置換成30%的PBST溶液,染色體原位雜交,放置5分鐘

3) 置換成PBST溶液,放置5分鐘,重復一次

4) 置換成4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘

5) 用PBST洗兩次,每次放置五分鐘,室溫。

蛋白酶處理與后固定(本實驗不做此步)

1) 用10ul/ml的蛋白酶K在室溫下處理胚胎。5體節以下的胚胎不處理,5體節到24小時的胚胎處理3分鐘,24小時以上的胚胎處理5分鐘或者更長。發育時間越短的胚胎越嫩,染色體熒光原位雜交,可以不用或者少用蛋白酶處理,發育時間長的胚胎就需要用蛋白酶來疏松組織,以便于雜交。

2) 用PBST溶液輕洗,在PBST中放置5分鐘。

3) 用4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘,室溫。

4) 用PBST洗兩次,每次放置五分鐘,室溫。

原位雜交技術還在以下生物領域有應用:

生態學和環境科學:在生態學和環境科學領域,原位雜交技術可以用于研究生物與環境之間的相互作用。例如,通過標記特定基因的探針,可以檢測環境中微生物種群的分布和變化,原位雜交,進而研究其對環境的影響和作用。

進化生物學:在進化生物學領域,原位雜交技術可以用于研究物種之間的遺傳差異和進化關系。例如,熒光原位雜交,通過比較不同物種之間基因序列的差異,可以揭示物種之間的親緣關系和進化歷程。

植物組織原位雜交的步驟包括以下幾個方面:

1. 制備組織樣品:從植物中取出需要研究的組織樣品,如根、莖、葉等。

2. 固定組織樣品:將組織樣品固定在載玻片上,通常使用或乙醇等化學物質進行固定。

3. 處理組織樣品:對固定的組織樣品進行脫水、透明化、脫脂等處理,以便于DNA探針的穿透和結合。

4. 制備DNA探針:根據需要研究的基因序列,設計并合成DNA探針。DNA探針可以標記熒光染料或性同位素,以便于檢測。

5. 雜交DNA探針:將DNA探針與組織樣品進行雜交,通常需要在高溫下進行,以便于DNA探針與RNA或DNA結合。

6. 檢測雜交信號:通過熒光顯微鏡或計數器等設備,檢測DNA探針與RNA或DNA的結合情況,確定目標基因的表達模式和位置。

熒光原位雜交-貝科新肽(在線咨詢)-原位雜交由武漢貝科新肽科技有限公司提供。行路致遠,砥礪前行。武漢貝科新肽科技有限公司致力成為與您共贏、共生、共同前行的戰略伙伴,更矢志成為化學試劑具有競爭力的企業,與您一起飛躍,共同成功!

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