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武漢貝科新肽科技有限公司

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原位雜交檢測-湖北原位雜交-貝科新肽

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原位雜交的基本原理是利用標記的核酸探針與細胞或組織中的DNA或RNA進行雜交,原位雜交檢測,然后通過檢測標記來識別探針的位置。這使得研究人員能夠在細胞或組織中確定特定基因或基因組區域的位置和表達水平。

原位雜交可以用于多種類型的實驗。例如,它可以用來檢測特定基因在發育過程中的表達模式,或者確定特定基因變異在細胞中的分布。此外,原位雜交還可以用于診斷疾病,例如某些類型的,以及監測效果。

雜交?。?) 盛有2×SSC的塑料盤同,將干烤的濾膜飄浮在液面上,浸濕5分鐘。(2) 將濾膜轉到200ml預洗液的玻璃皿中。濾膜何疊在一起,放于溶液中。用保鮮膜蓋住玻璃皿,放到位于培養箱內的旋轉平臺上。于50℃處理30分鐘。在這一步及以后的所有步驟中,應緩緩搖動濾膜,防止它們粘在一起。(3) 用泡過預洗液的吸水棉紙輕輕地從膜表面拭去細菌碎片,以降低雜交背景而不影響陽性雜交信號的強度和清晰度。(4) 將濾膜轉到盛有150ml預雜交液的玻璃中,在適宜溫度(即在水溶液中雜交時用68℃,而在50%甲酰胺中雜交時用42℃)下,預雜交1-2小時。

組織原位雜交(Tissue in situ hybridization),即原位雜交組織化學技術和原位雜交細胞化學技術

原位雜交技術的基本原理

利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序,染色體原位雜交,通過堿基對之間非共價鍵的形成,出現穩定的雙鏈區,植物原位雜交,形成雜交的雙鏈。

1.兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,通過氫鍵結合,形成DNA-DNA、DNA一RNA或RNA一RNA雙鍵分子

2.應用帶有標記的(有性同位素,如3H、35S、32P,湖北原位雜交,熒光素、生物素、等非性物質)DNA或RNA片段作為核酸探針,與組織切片或細胞內待測核酸(RNA或DNA)片段進行雜交

3.用自顯影等方法予以顯示,在光鏡或電鏡下觀察目的mRNA或DNA的存在與定位

用原位雜交術,可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達。

此方法有很高的敏感性和特異性,可進一步從分子水來探討細胞的功能表達及其調節機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。

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