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武漢科銳諾生物科技有限公司

主營:外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術服務

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植物原位雜交技術服務-科銳諾生物科技(圖)

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意義

在研究DNA分子原理的基礎上發展起來的一種技術。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,能過氫鍵結合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點,應用帶有標記的(有性同位素,如3H、35S、32P、熒光素生物素、等非性物質)DNA或RNA片段作為核酸探針,與組織切片或細胞內待測核酸(RNA或DNA)片段進行雜交,然后可用自顯影等方法予以顯示,在光鏡或電鏡下觀察目的 mRNA或DNA 的存在并定位;用原位雜交技術,可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達。此方法有很高的敏感性和特異性,可進一步從分子水平來探討細胞的功能表達及其調節機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。

適用場景

1、高靈敏度地檢測蛋白-蛋白的交互作用;

2、尋找在蛋白-蛋白交互作用中起關鍵作用的結構域或活性位點;

3、尋找與靶蛋白相互作用的新蛋白;

4、尋找具有藥1物治1療作用的小分子多肽;

5、尋找調控蛋白質相互作用的化合物;

6、繪制蛋白質相互作用圖譜。

酵母雙雜交技術的優點

1、無需純化蛋白;

2、檢測在活1細胞內進行,可以在一定程度上代表體內的真實情況;

3、檢測的結果是基因表達產物的積累效應,植物原位雜交技術服務,因而可檢測存在于蛋白質之間的微弱的或暫時的相互作用;

4、酵母雙雜交系統可采用不同組織、器1官、細胞類型和分化時期材料構建cDNA文庫,并能分析細胞質、細胞核等多種亞細胞部位的蛋白。

應用于分子病理診斷的DNA測序技術有直接測序法和焦磷酸測序法。直接測序技術主要是Sanger等發明的雙脫氧鏈末端終止法。其原理就是根據核苷酸在某一固定的點開始,隨機在某一個特定的堿基處終止,產生A、T、C、G4組不同長度的一系列核苷酸,然后在尿素變性的PAGE膠上電泳進行檢測,從而獲得DNA序列。直接測序法是基因突變檢測的“金標準”,其優點是結果準確,重復性好,可檢測整個測序范圍內已知和未知突變點;缺點是步驟多,耗時長,靈敏度低,過程不易控制,在檢測已知突變位點方面將逐漸被熒光定量PCR法替代。

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