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武漢貝科新肽科技有限公司

主營:原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動子篩選

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GISH-武漢貝科新肽

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這一原理對于檢測一個特異的mRNA在某一種生物體,或者某些組織切片、單個細(xì)胞里具體表達(dá)位置非常有用。該技術(shù)早應(yīng)用于60年代末期,由于核酸分子雜交的特異性高,并可定位,因此該技術(shù)已被廣泛應(yīng)用,例如與細(xì)胞內(nèi)RNA進(jìn)行雜交以觀察該組織細(xì)胞中特定基因表達(dá)水平。原位雜交能在成分復(fù)雜的組織中進(jìn)行單一細(xì)胞的研究而不受同一組織中其他成分的影響,因此對于那些細(xì)胞數(shù)量少且散在于其他組織中的細(xì)胞內(nèi)DNA或RNA研究更為方便;同時由于原位雜交不需要從組織中提取核酸,對于組織中含量極低的靶序列有極高的敏感性,并可完整地保持組織與細(xì)胞的形態(tài),更能準(zhǔn)確地反映出組織細(xì)胞的相互關(guān)系及功能狀態(tài)。

原位雜交的基本原理是利用標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞或組織中的DNA或RNA進(jìn)行雜交,然后通過檢測標(biāo)記來識別探針的位置。這使得研究人員能夠在細(xì)胞或組織中確定特定基因或基因組區(qū)域的位置和表達(dá)水平。

原位雜交可以用于多種類型的實驗。例如,GISH,它可以用來檢測特定基因在發(fā)育過程中的表達(dá)模式,或者確定特定基因變異在細(xì)胞中的分布。此外,原位雜交還可以用于診斷疾病,例如某些類型的,以及監(jiān)測效果。

原位雜交技術(shù)的技術(shù)流程

原位雜交技術(shù)的技術(shù)流程包括樣本處理、探針制備、雜交反應(yīng)和信號檢測等步驟。樣本處理包括組織或細(xì)胞的固定、包埋、切片和脫氧核糖核酸酶消化等步驟,目的是保持組織或細(xì)胞的原始結(jié)構(gòu)和核酸序列的完整性。探針制備包括標(biāo)記探針、純化和變性等步驟,目的是提高探針的特異性和敏感性。雜交反應(yīng)包括預(yù)雜交、雜交和洗脫等步驟,目的是使探針與目標(biāo)核酸序列形成雙鏈復(fù)合物。信號檢測包括顯色反應(yīng)、熒光染色和性同位素標(biāo)記等步驟,目的是可視化目標(biāo)核酸序列的分布。

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