GISH-武漢貝科新肽

詢盤(pán)留言 |投訴|申領(lǐng)|刪除 產(chǎn)品編號(hào)：589872899 更新時(shí)間：2025-01-05

武漢貝科新肽科技有限公司

主營(yíng)業(yè)務(wù)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
公司官網(wǎng)：bkxtbio.com.cn
公司地址：湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號(hào)紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號(hào)

業(yè)務(wù)熱線： 15002786799 (夏先生先生)

產(chǎn)品詳情
聯(lián)系方式

供貨總量 : 不限
價(jià)格說(shuō)明 : 議定
包裝說(shuō)明 : 不限
物流說(shuō)明 : 貨運(yùn)及物流
交貨說(shuō)明 : 按訂單

和其它實(shí)驗(yàn)方法一樣，必須同時(shí)設(shè)對(duì)照試驗(yàn)以證明其實(shí)驗(yàn)結(jié)果特異性。對(duì)照試驗(yàn)的設(shè)置須根據(jù)核酸探針和靶核苷酸的種類(lèi)和現(xiàn)有的可能條件去選定。ISHH的優(yōu)點(diǎn)是它的高度特異性，它可測(cè)定組織、培養(yǎng)的單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞提取物中的核苷酸含量。應(yīng)用高敏感度的性標(biāo)記cRNA探針在理想的ISHH的實(shí)驗(yàn)條件下檢測(cè)mRNA，其敏感度可達(dá)到20個(gè)mRNA拷貝/每個(gè)細(xì)胞。由于雙鏈DNA的穩(wěn)定性，在用ISHH定位DNA時(shí)很少發(fā)生丟失，降解，其敏感性高到能夠顯示在染色體鋪片上，有時(shí)甚至在組織切片上的單個(gè)基因拷貝。正因?yàn)槿绱耍瑢?duì)ISHH結(jié)果的解釋?xiě)?yīng)持慎重態(tài)度，特別是前人未報(bào)告過(guò)的新發(fā)現(xiàn)。

一. 原位雜交天

1. 重新水化和固定

1）吸取固定好的胚胎，加入50%的PBST溶液，放置5分鐘。

2）置換成30％的PBST溶液，放置5分鐘

3）置換成PBST溶液，放置5分鐘，重復(fù)一次

4）置換成4％多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘

5）用PBST洗兩次，每次放置五分鐘，室溫。

蛋白酶處理與后固定（本實(shí)驗(yàn)不做此步）

1）用10ul/ml的蛋白酶K在室溫下處理胚胎。5體節(jié)以下的胚胎不處理，5體節(jié)到24小時(shí)的胚胎處理3分鐘，24小時(shí)以上的胚胎處理5分鐘或者更長(zhǎng)。發(fā)育時(shí)間越短的胚胎越嫩，可以不用或者少用蛋白酶處理，發(fā)育時(shí)間長(zhǎng)的胚胎就需要用蛋白酶來(lái)疏松組織，以便于雜交。

2）用PBST溶液輕洗，在PBST中放置5分鐘。

3）用4％多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘，室溫。

4）用PBST洗兩次，每次放置五分鐘，室溫。

熒光原位雜交（FISH）技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn)：

可多重染色：利用不同的熒光染料標(biāo)記不同的探針，GISH，可以實(shí)現(xiàn)多重?zé)晒庠浑s交，從而同時(shí)檢測(cè)多個(gè)序列，提高實(shí)驗(yàn)效率了。

高度創(chuàng)新性和性：FISH技術(shù)不僅可以用于研究已知基因或序列的染色體定位，還可以用于未基因或遺傳標(biāo)記及染色體畸變的研究，在基因定性、定量、整合、表達(dá)等方面的研究中頗具優(yōu)勢(shì)。

GISH-武漢貝科新肽由武漢貝科新肽科技有限公司提供。武漢貝科新肽科技有限公司堅(jiān)持“以人為本”的企業(yè)理念，擁有一支高素質(zhì)的員工隊(duì)伍，力求提供更好的產(chǎn)品和服務(wù)回饋社會(huì)，并歡迎廣大新老客戶光臨惠顧，真誠(chéng)合作、共創(chuàng)美好未來(lái)。貝科新肽——您可信賴的朋友，公司地址：湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號(hào)紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號(hào)，聯(lián)系人：夏先生。

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