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武漢貝科新肽科技有限公司
主營：原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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原理簡介
GFP、RFP等熒光蛋白因其的熒光性質和靈敏性，常作為報告基因研究并分析基因產物在細胞中的定位和相互作用等。將目標蛋白與熒光蛋白的N端或者C端融合，通過瞬時轉化技術或穩(wěn)定遺傳轉化技術，使得該融合蛋白在受體材料細胞內表達，目標蛋白會牽引熒光蛋白一起定位到目標細胞器，通過顯微鏡觀察熒光蛋白在細胞內顯示的位置，確定目標蛋白的位置，從而確定目標蛋白的亞細胞定位情況。
啟動子篩選：尋找基因表達的關鍵調控元件
基因表達的調控是一個復雜的過程，其中關鍵的環(huán)節(jié)之一就是轉錄的啟動子。轉錄是生物體內基因表達的重要步驟，雙分子熒光互補技術，而轉錄的啟動子則是這一過程的關鍵調控元件。因此，啟動子的篩選對于理解基因表達的調控機制以及疾病的等方面都具有重要的意義。
啟動子的篩選通常是通過生物信息學的方法進行的。首先，通過基因組測序和生物信息學分析，可以確定基因的啟動子區(qū)域，這一區(qū)域通常位于基因編碼區(qū)的上游。然后，通過各種預測算法，可以分析啟動子區(qū)域內的DNA序列，以確定是否存在轉錄因子的結合位點。這些轉錄因子通常是蛋白質，它們可以與DNA序列結合，從而影響轉錄的效率和程度。
蛋白質亞細胞定位的研究方法
1、融合報告基因定位法
將綠色熒光蛋白（GFP）及其衍生蛋白、β-葡萄糖苷酸酶（GUS）等報告基因，與目標蛋白基因融合在一起，由目標蛋白的引導信號進行亞細胞定位，對報告蛋白的光信號進行跟蹤和觀察，從而確定目標蛋白的定位。該方法是目前使用廣泛的蛋白質亞細胞定位研究方法。
2、熒光標記定位法
將反應與化學光學信號相結合，通過特異性的熒光標記與目標蛋白（抗原）結合，通過熒光信號檢測，確定目標蛋白的亞細胞位置。目前標記信號不局限于熒光素，還有同位素、酶、膠體金顆粒、納米金屬顆粒等。
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第3年
