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考馬斯亮藍法測定蛋白質含量流程：

該方法用于大多數蛋白質的定量是比較精que的，但不適用于小分子堿性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污劑的濃度超過0．2%影響測定結果。如TritonX-100、SDS、NP-40等。

1．Bradford濃染液的配制：將100mg考馬斯亮藍G-250溶于50ml 95%乙醇，加入100ml85%的磷酸，然后，用蒸餾水補充至1000ml，此染液放4℃至少6個月保持穩定。

2．標準曲線蛋白質樣本的準備：盡量使用與待測樣本性質相近的蛋白質作為標準品，自貢玻璃水亮藍，例如測定抗ti，可用純化的抗ti作為標準。如果待測樣本是未知的，也可用抗ti作為標準蛋白。通常在20ug—150ug/100ul之間繪制標準曲線。

3．將待測樣本溶于緩沖溶液中，該緩沖溶液應與制作標準曲線的緩沖溶液相同(hao用PBS)。

4．按1：5用蒸餾水稀釋濃染料結合溶液，如出現沉淀，過濾除去。

5．每個樣本加5ml稀釋的染料結合溶液，作用5～30min。染液與蛋白質結合后，將由紅色變為藍色，在595nm波長下測定其吸光度。注意，顯色反應不得超過30min．

6．根據標準曲線計算待測樣本的濃度。

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亮藍毒理學依據

1．LD50 大鼠口服大于2g/kg體重。

2．ADI 0~12.5mg/kg體重（FAO/WHO，1994）

使用 著色劑。

1．使用注意事項 參見莧菜紅。

2．使用范圍及使用量 我國《食用添加劑使用衛生標準》（GB 2760-1996）規定：可用于高糖果汁（味）、果汁（味）飲料、碳酸飲料、配制酒、糖果、糕點上彩裝；染色櫻桃罐頭（系裝飾用，不宜食用）。用于青梅、蝦（味）片，da使用量0.025g/kg；用于冰淇淋，da使用量0.022g/kg；用于紅綠絲，da使用量0.1g/kg。

亮藍為有金屬質感的淺紫色至古銅色顆粒物或粉末狀，無臭。溶于于水，玻璃水亮藍批發，溶液呈亮藍色；可溶精、丙二醇和凡士林。耐光性性、耐溫性、耐堿性、耐鹽性和耐微生物性非常好，耐酸性和耐氧化還原反應特點。弱酸性時呈青色，強堿時呈黃色，在燒開溶液中呈藍紫色。亮藍的飽和度極強，玻璃水亮藍廠家，一般全是與別的服用添加劑相互配合應用，使用量小，在0.0005%~0.01%中間。裝飾藝術蔬菜水果、可可制品、巧克力朱古力制品(包含可可脂朱古力及制品）及其糖塊（05.01.01可可制品、05.04裝飾設計糖塊、頂飾和甜汁以外）、點心上彩裝?？蛻粼趹帽井a品前要認真閱讀GB2760《食用添加劑應用質量標準》，每個純色種類的應用范疇和使用量會大不一樣。