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動物組織原位雜交-武漢貝科新肽公司-原位雜交

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原位雜交(In situ hybridazation)

固定

收集斑馬魚的胚胎,動物組織原位雜交,在Holfretor水中培養(yǎng),到達(dá)所需要的發(fā)育時(shí)期時(shí),用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小時(shí)后用50%2%多聚甲醛溶液洗,然后換成,植物組織原位雜交,在-20C 保存,待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用處理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培養(yǎng),可阻斷色素的形成)

熒光原位雜交(Fluorescence In Situ Hybridization,F(xiàn)ISH)是在性原位雜交技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非性分子生物學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)結(jié)合的新技術(shù),熒光原位雜交,是以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法。

FISH技術(shù)具有許多優(yōu)點(diǎn),如非性、高特異性、高靈敏度、快速簡便、可多重染色等。這些特點(diǎn)使得FISH技術(shù)在細(xì)胞生物學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用,例如用于研究基因表達(dá)、基因組變異和染色體異常等。

原位雜交技術(shù)的原理是什么?有何用途

原位雜交技術(shù)的原理是利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基序列,原位雜交,將有性或非性的外源核酸(即探針)與組織、細(xì)胞或染色體上待測DNA或RNA互補(bǔ)配對,結(jié)合成專一的核酸雜交分子,經(jīng)一定的檢測手段將待測核酸在組織、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列要具備3個(gè)重要條件:組織、細(xì)胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補(bǔ)的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標(biāo)記物(曾呈奎等2000)。

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