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武漢貝科新肽科技有限公司

主營(yíng):原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選

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植物原位雜交-原位雜交-武漢貝科新肽

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預(yù)雜交

1)每個(gè)管中置換成大約300ulHYB-溶液,60℃水浴5分鐘,避免振蕩。

2)用等體積的HYB+取代HYB-。

3)60℃水浴,原位雜交,預(yù)雜交4小時(shí)以上。

雜交

1)吸去預(yù)雜交的HYB+,加上100ul已加入探針的HYB+溶液(探針濃度約為1ng/ul)..

2)60℃ 溫浴過(guò)夜。

 注:雜交與預(yù)雜交的溫度可以是55到60度不等,溫度越低,探針結(jié)合越好,溫度越高,背景越小。

熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,F(xiàn)ISH)是在20世紀(jì)80年代末在性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種非性分子細(xì)胞遺傳技術(shù),以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導(dǎo)分子(reporter molecule)結(jié)合,原位雜交檢測(cè),雜交后再通過(guò)細(xì)胞化學(xué)過(guò)程連接上熒光染料.FISH的基本原理是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標(biāo)記,然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上,染色體原位雜交,再用與熒光素分子偶聯(lián)的單與探針?lè)肿犹禺愋越Y(jié)合來(lái)檢測(cè)DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對(duì)定量分析.FISH具有安全、快速、靈敏度高、探針能長(zhǎng)期保存、能同時(shí)顯示多種顏色等優(yōu)點(diǎn),不但能顯示中期分裂相,還能顯示于間期核.同時(shí)在熒光原位雜交基礎(chǔ)上又發(fā)展了多彩色熒光原位雜交技術(shù)和染色質(zhì)纖維熒光原位雜交技術(shù).

原位雜交技術(shù)在許多領(lǐng)域都有應(yīng)用,以下是其中幾個(gè)具體應(yīng)用:

細(xì)胞生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué):在細(xì)胞生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)領(lǐng)域,原位雜交技術(shù)常被用于研究基因的表達(dá)和定位。例如,通過(guò)標(biāo)記特定基因的探針,可以在細(xì)胞或組織中檢測(cè)特定基因序列的存在和分布,進(jìn)而了解基因在細(xì)胞分化、發(fā)育和功能中的作用。

基因組學(xué)和遺傳學(xué)研究:原位雜交技術(shù)也可用于基因組學(xué)和遺傳學(xué)研究。例如,通過(guò)標(biāo)記多個(gè)基因探針,可以檢測(cè)基因組中的多個(gè)基因序列,從而進(jìn)行基因定位、基因表達(dá)譜分析、基因突變檢測(cè)等研究。

病毒學(xué)和病原微生物研究:在病毒學(xué)和病原微生物學(xué)領(lǐng)域,原位雜交技術(shù)常被用于檢測(cè)和定位病毒、細(xì)菌等病原微生物。例如,植物原位雜交,通過(guò)標(biāo)記特異性或核酸探針,可以檢測(cè)組織中病原微生物的存在、情況以及分布特征,從而為疾病的預(yù)防、診斷和提供依據(jù)。

總之,原位雜交技術(shù)在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、基因組學(xué)、遺傳學(xué)、病毒學(xué)和病原微生物學(xué)等領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,為人類認(rèn)識(shí)生命現(xiàn)象、探究疾病機(jī)制和提供了有力的技術(shù)支持。

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